DNA synthesis جو بنيادي اصول

ڪيميائي ڊي اين اي جي ٺهڻ جو بنياد مضبوط-مرحلي سنٿيسس حڪمت عملي ۽ فاسفورامائڊائٽ ڪيمسٽري تي آهي.حياتياتي ڊي اين اي جي جوڙجڪ کان مختلف، ڪيميائي ڊي اين اي جي جوڙجڪ ۾ مواد DMT (4, 4-dimethoxytrityl) ۽ فاسفورامائڊائٽ تبديل ٿيل ڊي آڪسائيريبوڪسائڊ آهي، جيئن تصوير 1 ۾ ڏيکاريل آهي. ڊي اين اي جي جوڙجڪ مضبوط سپورٽ تي ڪيو ويندو آهي (اسان پيش ڪري سگهون ٿا مختلف قسم جااوليگو سنٿيسس ڪالمن)، يعني سي پي جي (ڪنٽرول ٿيل پور گلاس) ۽ پي ايس (پوليسٽيرين)، ۽ سڄو سنٿيسس هڪ تي ڪيو ويندو آهي.DNA/RNA سنٿيسائزر، جيڪو اسان جو مکيه سامان آهي، ان جا مختلف ماڊل آهن جهڙوڪ: HY سنگل چينل سنٿيسائيزر، HY-12، HY-192 وغيره، سنٿيسز جو رخ 3' کان 5' تائين آهي، ۽ هڪ نيوڪليوٽائيڊ متعارف ڪرايو ويندو آهي مضبوط سپورٽ لاءِ هڪ ذريعي. synthesis چڪر.هڪ عام طور تي ٺهڪندڙ چڪر ۾ چار مرحلا شامل آهن، Deprotection، Coupling، Capping and Oxidation (Figure 2).Deprotection DMT گروپ کي مضبوط سپورٽ تي هٽائڻ لاءِ مقرر ڪيو ويو آهي يا پوئين nucleoside تي 5 'hydroxyl گروپ، 3% trichloroacetic acid dichloromethane ۾ deprotection reagent طور استعمال ڪيو ويندو آهي.پوءِ فاسفورامائڊائٽ تبديل ٿيل ڊي آڪسيريبوڪسائيسائيڊ کي اجازت ڏني وئي ته هائيڊروڪسيل گروپ کي ايڪٽيوٽر جي مدد سان، يعني 5-ethylthiotetrazole يا 4، 5-dicyanoimidazole، ٺاهيندي phosphitetriester (III)، ۽ Coupling step کي محسوس ڪيو.هڪ ڪيپنگ قدم ڪيو ويندو آهي غير رد عمل ٿيل هائيڊروڪسيل گروپ کي بلاڪ ڪرڻ لاءِ گڏيل قدم جي دوران، اڻ وڻندڙ ​​خرابين جي ترتيب کي گهٽائڻ لاءِ.آخرڪار، غير مستحڪم فاسفيٽٽريسٽر (III) کي ڪيميائي اسٽيبل فاسفورٽريسٽر (V) ۾ آڪسائيڊ ڪيو ويو آهي آئوڊين سان گڏ آڪسائيڊٽ طور pyridine جي موجود ۾.

ٺهڪندڙ ڊي اين اي کي امينولائسز ذريعي مضبوط مدد سان ڪليويج ٿي سگهي ٿو، فاسفورٽريسٽر تي 2-سائيانوٿيل محفوظ ٿيل گروپ ۽ نيوڪليو بيس تي امائيڊ هڪ ئي وقت ڪليوجيجي وڃي ٿو، ريڪز ۾ سنٿيسس پليٽس ۽ سنٿيسس ڪالمن سڌو سنئون رد عمل واري چيمبر ۾ رکيل آهن. جوبچاءُ جو سامان.خام ڊي اين اي تيار ٿي سگھي ٿو HPLC، electrophoresis ۽ OPC جي طلب تي، اسان پڻ توهان کي مهيا ڪري سگهون ٿاصفائي جو سامانپوسٽ پروسيسنگ لاء.

DNA سنٿيسس جو بنيادي اصول 1

شڪل 1. ڊي اي جي ڪيميائي ساختBzفاسفورامائڊائٽ.

DNA جي جوڙجڪ جو بنيادي اصول 2

شڪل 2. ڪيميائي ڊي اين اي ٺاھڻ جو ميکانيزم.


پوسٽ جو وقت: آگسٽ-09-2022